在1986年的时候,原国家计划生育委员会科学技术研究所陈振文承担了国家计生委重点项目“人类精子超低温冷冻保存技术的研究和人类精子库的建立”,并在WHO的培训和资助下建立了人类精子库,其目的在于开展生殖保险,为输精管绝育志愿者解除后顾之忧。但就目前来看,精子冷冻还暂时不能完美解决这一难题,因为冷冻精子会对其造成4大损伤。

冷冻精子是为帮助男性不育

冷冻精子为输精管绝育者解除后顾之忧

成功的精子冷冻保存要求在解冻后保持精子结构和功能的完整性。为了保证正常的体内、体外受精能力,精子的细胞器必须在冷冻和解冻过程中得到保护,特别是顶体、鞭毛和中段等结构。

精子冷冻解冻后要保持结构和功能

冷冻精子不能破坏精子的结构和功能

然而,这些细胞器对冷冻损伤(例如渗透压)的敏感性是不同的。有时候,当精子活动率得到很好保护时,或许顶体的完整性却受到了严重的损伤。因此,设置理想的冷冻解冻流程在某种程度上是一门平衡的艺术。

1、对精子活动能力的影响

虽然人类精子库(humanspermbank)是利用超低温冷冻保存等技术,采集、检测、保存和外供人类精子用于治疗不育症、提供生殖保险,并进行相关研究的,但其对精子活力仍然有一定的影响。

冷冻精子对精子活动能力有一定影响

冷冻可导致精子运动能力受损

冷冻可导致精子运动能力受损,实验结果显示,冷冻后精子的活动率会下降。不同样本、不同冷冻方法,其冷冻复苏率不同。所以在冷冻精子时,一定要做好选择。

由上面的冷冻方法和精子冷冻复苏率可以看出,无论是正常精液冷冻,微囊单精子冷冻,还是冷冻环冷冻等,这些冷冻方法对于精子的活性都有一定的影响。

2、顶体损伤

冷冻可导致精子顶体的损伤,顶体损伤程度直接影响冷冻精子的受精能力。冷冻后部分精子会出现顶体肿胀及破损。顶体损伤主要发生于解冻时,严重时可致精子死亡。与新鲜精子相比,冷冻精子获能及顶体反应提前。

3、精子质膜损伤

冷冻和解冻过程可导致精子质膜受损,进而损害精子的运动能力。膜损伤的程度可以通过测定细胞膜不饱和脂肪酸的脂类过氧化值(lipidperoxidation,LPO)确定。

4、DNA损伤

Spano等(1999)使用吖啶橙对精子头进行DNA染色,发现冷冻后精子头荧光强度下降,表明精子DNA的完整性受损。Chohan等(2004)进一步证实上述结果,同时发现不同个体精子DNA在冷冻后的损伤程度不同,因个体差异,部分个体的精子DNA更易因冷冻受损。

精子DNA的完整性受损可能是冷冻造成的

冷冻精子有可能导致其DNA的完整性受损

有研究报道,当DNA受损的精子超过30%时精子无法通过试管婴儿技术正常受精,因此,Chohan等(2004)建议在使用冷冻精液进行人工授精前应检测精子DNA的损害程度。

人类精子库同时面向健康人群和男性不育患者两个群体,应当承担男性生殖遗传资源的保存、开发和利用的研究任务。
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